技术简介

构建稳定细胞系的基本原理是将外源DNA克隆岛具有某种抗性的载体上吗，载体被转染岛宿主细胞并整合到宿主染色体中，用载体中所含的抗性标志进行筛选。最常用对的真核表达载体的抗性筛选标志物有新霉素、嘌呤霉素（puromycin），常用G418来代替新霉素进行选择性筛选，筛选得到可稳定表达目的蛋白，或者稳定表达沉默特定基因的细胞株。慢病毒几乎可以感染所有种类的细胞，并且在感染后可以整合到受感染细胞的基因组中，进行长时间的稳定表达，因此，慢病毒常用于制备稳定表达/沉默特定基因的单克隆细胞株。

服务内容

①目的细胞预感染和目的细胞的puromycin敏感性检测；②慢病毒载体构建与包装；③Puromycin筛选稳转株；④稳转株鉴定。

服务说明

①客户提供目的基因的信息、目的细胞及信息和其他特殊要求等；②公司构建慢病毒载体及筛选稳转株。

实验报告内容

①构建稳定细胞株实验所需试剂耗材、仪器设备信息；②详细的实验方法； ③稳转株及对照稳转株；④公式构建载体的，提供载体及带有载体的菌液各一份及相关的序列信息。