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IP
免疫共沉淀
免疫共沉淀Co-IP 是利用抗原和抗体的特异性结合以及细菌的Protein A或G特异性地结合到免疫球蛋白的Fc片段的现象开发出来的方法。主要用于研究蛋白质之间的相互作用。
①样本总蛋白提取及与特定抗体反应;②用Protein A/G捕获特定的抗体—蛋白复合物;③洗涤去掉未被捕获的蛋白,得到纯蛋白抗体符合物;④通过SDS-PAGE或Western Blot检测IP结果;⑤向客户提交实验结果图、分析结果及实验报告。
①客户提供符合要求的实验样品:a组织:离体后迅速超低温处理并-80℃冻存的组织样品,干冰运输;组织:动物组织不少于400 mg;植物组织不少于2 g;细胞:2x107个细胞;b.直接提供蛋白样品:动植物组织/器官或含诱饵蛋白及目标蛋白的裂解液;c.提供表达质粒:质粒需测序验证,提供测序峰图,防止基因模板或表达质粒本身碱基突变,造成实验延误;c.提供基因序列,有公司负责诱饵蛋白或目标蛋白的表达;②客户提供用于免疫检测的一抗>20ul。
①实验所需试剂及仪器;②详细的实验方法;③实验结果照片。